提要：方针窥察甘草炮制雷公藤Tripterygiumwilfordii后对小鼠血清中代谢产品的影响，开头探究其下降肝毒性的也许代谢通路。法子将C57BL/6小鼠随机分为对比（Con）组、雷公藤（Raw）组、甘草炮制雷公藤（Pro）组，窥察小鼠肝机关病理转变，探测小鼠肝机能生化目标、炎症因子程度；哄骗液质联用（LC-MS）技能连系代谢组学法子，对各组间的代谢差别举办表征。完毕与Raw组比拟，Pro组小鼠肝机关损伤显著改正，肝机能生化目标、炎症因子程度显著下降，讲解甘草炮制雷公藤后也许降矮小鼠肝毒性；共挑选出脂肪酸、磷脂酸、甘油酯、磷脂酰胆碱、胆酸等12个潜在生物标识物，首要波及脂肪酸生物合成、甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢等9个代谢通路。论断甘草炮制雷公藤可有用降矮小鼠的肝毒性，其机制也许与调治脂肪酸代谢等通路干系，为其临床公道运用供给参考根据。
雷公藤为卫矛科雷公藤属植物雷公藤TripterygiumwilfordiiHook.f.的枯燥根，产于福建、河南、浙江、安徽等地。其味苦、辛，性寒，有大毒，归肝、肾经，有祛风湿、活血化瘀、通络止痛、消肿止痛、杀虫解毒等工效[1-2]。临床上调节类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等自己免疫性疾病完毕优良[3-4]，但其毒性较大，易损伤肝肾系统、繁殖系统，且易引发中药药源性不良反映[5-6]，临床的普遍运用遭到束缚[7-8]。肝脏是雷公藤的首要毒性靶器官之一，雷公藤而至肝毒性与急性病毒性肝炎雷同，临床展现为乏力、恶心吐逆、肝脏有压痛等，病理看来肝脏本性性转变、细胞胪列凌乱、机关毁坏等[9]。
甘草味甘、性平，可和缓药性，在多年前，甘草的解毒工效已被《神农本草经》列为药之上品。雷公藤对肝脏毒副影响显著，甘草和缓峻烈其药性，可起到折衷脾胃、护肝保肝之效[10-11]。炮制是中药减毒增效的紧要道路之一，药物经炮制后，其性味、工效、归经、毒副影响等方面均会产生转变，进而最大限度地表现疗效。课题组前期钻研讲解，甘草炮制雷公藤也许有用下降其肝毒性，同时具备较好疗效[12-13]，但甘草炮制雷公藤的减毒机制尚不明确。本钻研经过确立小鼠肝损伤模子，评估甘草炮制雷公藤的减毒完毕，同时采取代谢组学对小鼠血清内源性代谢物的转变差别和生物标识物举办剖析，开头探究其也许的减毒影响机制，为甘草炮制雷公藤的临床公道运用供给参考根据。
1材料与仪器
1.1方剂与试剂
色谱级乙腈购自德国Darmstadt公司；干清水购自杭州娃哈哈公司；小鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）ELISA试剂盒（批号）、小鼠白介素-6（IL-6）ELISA试剂盒（批号）购自ThermoFisherScientific公司；天门冬氨酸氨基转氨酶（AST）探测试剂盒（批号）、丙氨酸氨基转氨酶（ALT）探测试剂盒（批号）购自长春汇力生物公司。
1.2药材
雷公藤药材（批号）购自福建三明，生甘草饮片（批号SAA11）病院中药房，经国都医科病院赵奎君教学判决，离别为卫矛科雷公藤TripterygiumwilfordiiHook.f.的枯燥根、豆科植物胀果甘草GlycyrrhizainflataBat.的枯燥根。
1.3仪器
LC-MS/MS-IT-TOF、InertsilODS-SPC18色谱柱购自岛津公司；0.22μm微孔滤膜购自Solarbio公司；BSAS-CW微量剖析天平购自Sartorius公司；KQE型超声仪购自昆山市超声仪器有限公司；YB-A中药毁坏机购自永康市速锋工贸有限公司；LGJ-18型冷冻枯燥机购自北京西四环科学仪器厂；白腊切片机购自上海莱卡仪器有限公司；GradientA10Mill-Q超纯水器购自美国Millipore公司；AISITE水浴锅购自天津市泰斯特仪器有限公司；Forma-86CULTFreezer超低温冰箱购自ThermoElectron公司。
1.4实习动物
SPF级C57BL/6雄性小鼠30只，8周龄，体品质20～22g，购自斯贝福（北京）生物技能有限公司，动物及格证号SCXK（京）--。小鼠豢养于国都医科病院实习动物中间，实习室及格证号SYXK（京）-，室温20～22℃，透风较好，处境肃静，室内坚持12h明暗瓜代。动物豢养哄骗的准则鼠饲料、水和通盘动物实习均依照国都医科病院动物伦理委员会干系规矩举办，动物伦理委员会允许编号为18-。
2法子
2.1药物制备
2.1.1生雷公藤索取物的制备精细称定适当雷公藤样本，打粉机打坏成细颗粒状，过24目筛，以8倍体积的水充足潮湿，浸泡1h后加热煮沸，回流索取45min，趁热经3层纱布滤过，滤渣加6倍体积的水，回流索取30min，滤过，归并滤液，于扭转挥发仪浓缩后冷冻枯燥成粉末，获得生雷公藤索取物，临用前溶于生理盐水配制成0.4g/mL的溶液，给药方量（以生药量计）为4g/kg。
2.1.2甘草炮制雷公藤索取物的制备甘草饮片以8倍体积的水浸泡1h，煎煮30min，趁热滤过，反复煎煮2次后归并滤液，浓缩后浸泡雷公藤30min，于℃炒10min至雷公藤药材表面不粘手，获得雷公藤炮成品。取雷公藤炮成品，按“2.1.1”项制备法子，获得甘草炮制雷公藤索取物，临用前溶于生理盐水配制成0.4g/mL的溶液，给药方量（以生药量计）为4g/kg[13-15]。
2.2分组与给药
小鼠适应性豢养1周后，随机分为对比（Con）组、雷公藤（Raw，4g/kg）组、甘草炮制雷公藤（Pro，4g/kg）组，每组10只。对比组ig生理盐水，其他各组ig药物，1次/d，继续10d。
2.3小鼠模范搜集与解决
2.3.1血清模范搜集与解决实习第10天，各组小鼠眼眶取血，4℃、r/min离心10min，汲取上清液。取血清依照ELISA试剂盒讲解探测TNF-α、IL-6、AST、ALT程度。取μL血清参预甲醇溶液，混匀静置，4℃、00r/min离心10min，取上清液，经0.22μm微孔滤膜滤过，进样探测。
2.3.2肝机关搜集与解决实习第10天，掏出肝机关，以生理盐水洗濯、4%多聚甲醛不变、乙醇溶液梯度脱水，包埋、切片、染色后，于光学显微镜下窥察。
2.4LC-MS/MS-IT-TOF探测
2.4.1色谱前提InertsilODS-SPC18色谱柱（mm×4.6mm，5μm）色谱柱，柱温为40℃，体积流量为1.0mL/min，进样量为10μL，滚动相A为0.1%甲酸水溶液，滚动相B为0.1%甲酸乙腈，梯度洗脱：0～3min，16%B；3～8min，16%～30%B；8～20min，30%～50%B；20～45min，50%～95%B。探测波长为nm，洗脱液直接引入质谱仪。为保证系统的不变性和反复性，将每个样本做为品质掌握（QC）样本归并，每5个样本插入并剖析。
2.4.2质谱前提离子源探测形式离别为ESI＋、ESI－；离子源电压离别为＋4.5kV、?3.5kV；扫描领域为m/z～0；加热块温度为℃；雾化气为N2，体积流量为1.5L/min；N2压力为kPa；脱溶剂管温度为℃。
2.5数据解决与统计
将数据导入MetaboAlalyst3.0（